10ul接种环是微生物实验中用于菌种接种、菌液转移的核心工具，广泛应用于细菌培养、菌落计数、药敏试验等场景。其精准操作直接影响实验结果的重复性与准确性，需严格遵循灭菌规范、取样技巧、接种操作三大核心流程，具体指南如下。
灭菌是避免杂菌污染的关键步骤，10ul接种环需采用干热灭菌或火焰灭菌两种方式，优先选择火焰灭菌，操作便捷且灭菌完整。
1.火焰灭菌流程：将接种环固定在接种棒上，手持接种棒末端，将接种环伸入酒精灯外焰，缓慢旋转灼烧至环体呈均匀红热状态，灼烧时间不少于30秒，确保杀灭环体表面的所有微生物。灼烧时需注意接种棒握持角度，避免火焰灼烧接种棒手柄导致材质碳化。
2.冷却处理：灭菌后的接种环温度较高，直接接触菌液会导致菌体死亡，需在无菌培养基的空白区域轻轻触碰冷却，或静置10–15秒自然降温，冷却过程中不可触碰非无菌区域，防止二次污染。
3.重复灭菌要求：每次接种完成后，需再次灼烧灭菌，避免菌种交叉污染；连续多次接种不同菌株时，需更换接种环或灭菌后再使用。
二、10ul接种环液体挂取核心技巧
10ul接种环的环体容积精准对应10μL液体，挂取时需控制力度与角度，确保液体量准确且不滴落，具体技巧如下。
1.挂取前状态确认：冷却后的接种环需保持干燥，若环体残留水珠，会稀释菌液浓度，导致取样量不准。可将接种环在无菌空气中轻晃，去除表面冷凝水。
2.液体挂取操作：手持接种棒，将接种环以30°–45°角缓慢浸入菌液或液体培养基中，确保环体全浸没，避免仅触碰液面导致挂液不足。随后匀速缓慢提起接种环，此时环内会自然形成一层液体薄膜，其体积即为精准的10μL。
若挂取高粘度液体（如含琼脂的半固体培养基），可适当降低浸入速度，防止液体粘连过多；若液体流动性强，提起后可在容器内壁轻靠一下，刮除多余液体。
3.防滴落控制：挂取液体后，接种环需保持水平或略微向下倾斜，避免剧烈晃动。转移过程中动作要平稳，若液体出现滴落趋势，可将接种环靠近容器内壁，利用表面张力将液体回吸至环内。
三、接种操作规范与使用后处理
1.接种操作要点：进行平板划线接种时，用挂有菌液的接种环在培养基表面轻轻划动，力度以不划破培养基为宜；进行液体接种时，将接种环直接浸入目标培养基，轻轻旋转后取出，确保液体全融入培养基。接种过程需在超净工作台内完成，操作时间尽量缩短，减少空气杂菌污染概率。
2.使用后清洁与灭菌：接种完毕后，立即将接种环灼烧灭菌，待环体冷却后，用无菌水冲洗环体表面残留的培养基，再次灼烧至红热状态，确认无残留后放置在接种环架上冷却备用。
3.常见误区规避：禁止用接种环反复搅拌液体培养基，防止环体变形影响挂液精度；避免未冷却的接种环直接接触菌液，造成菌体热死亡；不可用手触碰接种环任何部位，防止污染或烫伤。
10ul接种环的正确使用需兼顾灭菌完整性、挂液精准性与操作规范性，只有严格遵循流程，才能保障微生物实验数据的可靠与稳定。
